Geenitehnoloogia kordamisküsimuste vastused
Polümeraas ahelreaktsioonil kasutatakse praimeritena tuntud järjestuse alusel
sünteesitud oligonukleotiide, mis kinnituvad DNA erinevatele piirkondadele ning
milled vahel sünteesitakse korduvalt samapikkuselisi DNA- lõike. Praimerid on
alati paarikaupa, st seonduvad erinevate DNA- ahelatega. Esimeses tsüklis
sünteesitakse lähtuvalt praimeritest nn pikad DNA- lõigud, mis ületavad teise
vastaspraimeri seondumissaite. Teises tsüklis seondub teine vastaspraimer juba
sünteesitud DNA-ahelale ning selle ahela teine ots on esimese praimeri
seondumissait. Järelikult toimub edasin süntees praimerite seondumissaitide
vahel ning selle tulemusel moodustuvadki sama pikkusega DNA- fragmendid.
1. Sekveneeritav DNA denatureeritakse kuumutamisel 92-
95 kraadi juures 30 sekundit
2. Denatureeritud DNA hübridiseeritakse praimeri