Lahutusmeetodid
lõpeb ja analüüt fokuseerub kintsasse tsooni oma isoelektrilises
punktis. Kasutatakse valkude kirjeldamises.
Proteiinide kahemõõtmeline elektroforees ja SDS-PAGE
olemus.
SDS; elektroforeesi läbiviimine sõltub pH-st, valgu aminohappelisest
koostisest, st laengust. Valgud lõhutakse merkaptoetanooliga,
lõhutakse SDS-ga (dodetsüülsulfaat) nii, et laeng muutub võrdeliseks
molekulkaaluga (1 SDS 2 AH kohta), misläbi valk muutub
vardakujuliseks, liikudes aeglasemalt geelil oma pikkuse tõttu.
Kahemõõtmelisus
1. IEF - lahutamine laengu järgi
2. SDS-PAGE - proovi lahutamine suuruse järgi
SDS-PAGE eesmärk on lahutada valke suuruse alusel.
SDS - naatrium dodetsüülsulfaat, denatureerib valku peptiidahelaks,
primaarstruktuuriks.
PAGE - polüakrüülamiid geelelektroforees; kui denatureeritud valgud
elektrivälja panna, hakkavad nad liikuma "+" laengu suunas ühe
kiirusega