"vaheplasmiidi" - 1 õppematerjal

Molekulaar- ja rakubioloogia praktikum

 Järgneb elustamisefaas. Selleks lisame 500 µl vedelat LB söödet ja inkubeerime 30 minutit 37 kraadi juures.  Tsentrifuugime bakterid põhja  Eemaldame sööte bakterite pealt  Suspendeerin, et tekiks ühtlane lahus  Kannan bakterisegu Petri tassile.  Kallan klaasterad tassile ja loksutan et bakterid laiali kanduksid.  Asetame tassid 37 kraadi juurde kasvama . Mida ja miks me transformeerime? Millist tulemust ootad? Viime enda vaheplasmiidi bakterisse, et see paljuneks ja et tekiksid kolooniad. Vastavalt valged ja sinised. Meie tahame valgeid kolooniaid saada. Milleks lisasime antibiootikumi? Mis oleks saanud kui oleksime lisanud tertatsükliini? Selleks, et meie plasmiidis oli ampitsiliini resistentsussait. Kui lisame seda antibiootikumi, jäävad ellu ainult transformeeritud bakterid. Kui oleksime lisanud tertatsükliini pole midagi saanud, sest kõik bakterid oleksid surnud või siis oleks