Praktiline töö - SDS-PAGE PROTEOOMIKA
2. Inkubeerisime denatureerimiseks 95oC juures 5 minutit.
3. Jahutasime valguproovid jäävannis.
4. Raputasime eppendorvid, et saada valgutilgad põhjale.
Foreesiaparati asetamine:
Proovide jahutamise ajal asetsime geel foreesiaparaati. Seleks täidsime puhvrikambrid
jooksupuhvriga (0,25 M TRIS, 1,92 M glütsiin, 0,1% SDS, pH 8,3) ning eemaldasime kammi.
Forees:
1. Igasse taskusse kandsime 20 µl valguproovi. Viimasse taskusse panime 3 µl foreesredeli -
Thermo Scientific PageRuler Unstained Broad Range Protein Ladder.
2. Asetasime foreesivannile kaas, ühendasime juhtmed vooluallikaga ning lülitasime
vooluallikas sisse (pinge 150V, voolutugevus 30 mA).
3. Jätsime foreesiaparaati üheks tunniks kuni markerina kasutatav broomfenoolsinine on geeli
lõpuni jõudnud.
4. Lülitasime foreesiaparaati elektrivõrgust välja, kogusime puhvrivannidest puhver kokku ja
valasime tagasi puhvri pudelisse.
5