BIO- JA GEENITEHNOLOOGIA, EKSAM
Tavaliselt on
signaaliks värvimuutus. Juhul, kui lahus ei sisalda antigeeni, ensüümi-
antikeha kompleks pinnale ei seondu ning substraadi lisamisega signaali ei
kaasne. ELISA katse läbi viimiseks peab vähemalt üks antikeha olema
spetsiifiline konkreetse antigeeni suhtes. Teadmata hulgal antigeeni sisaldav
proov immuniseeritakse tahkele pinnale kas mittespetsiifiliselt (adsorptsioon)
või spetsiifiliselt (kihiline ELISA). Pärast antigeeni immuniseerimist lisatakse
tuvastusantikeha, mis moodustab antigeeniga kompleksi. Tuvastusantikeha
võib kovalentselt seonduda ensüümiga. Teise võimalusena võib
tuvastusantikeha tuvastada sekundaarse antikehaga, mis on seotud
ensüümiga biokonjugatsiooni abil. Iga etapi vahel pestakse üldjuhul plaat
pesulahusega, et eemaldada valgud või antikehad, mis pole spetsiifiliselt
seondunud. Pärast viimast pesu lisatakse substraat nähtava signaali
saamiseks, mis näitab antigeeni kogust proovis. ELISA on heterogeenne