Molekulaarbioloogia aruanne
IPTG-d. Pärast segamist valasin homogeenne sööde õhukese kihina Peetri tassile, kus ta jäi
mõneks ajaks tarduma.
52. IPTG-d on lac promootorit aktiveeriv reagent, X-gali on vaja, et bakterite elutegevuse käigus
söötmes oli näha sinist pigmenti, antibiootikumi lisatakse, et oleks võimalik selekteerida välja
bakterid, kuhu on sisse läinud plasmiid (edukalt transformeeritud elusad bakterid vastava
antibiootikumi juuresolekul)
4. Pärast inkubeerisin transformatsioonisegu 90 sekundit 42 °C juures (heat shock) ning tõstsin
tuubi 2 minutiks jääle (jahutamine)
5. Lisasin 500 μl LB vedelsöödet ning inkubeerisin kõik 30 minutit 37 °C juures termostaadis.
6. Fuugisin bakterid põhja 2 minutit. Tekkis sade rakkudest, mille pealt tuleb sööde ära valada.
Tuubi jäi umbes 100 μl.
7. Pipeti abil kandsin bakterid Peetri tassile (tardunud söötmele) ning kuulikeste abil loksutasin
bakterid ühtlaselt laiali