Mikroobifusioloogia
Samuti on oluline rakkude
tihedus kompetentide lahuses. Üldiselt, mida rohkem rakke on lahuses, seda
kõrgem on transformatsiooniefektiivsus. E. coli puhul peetakse optimaalseks 107-
108 rakku 1 ml kohta. Mõnel bakteriliigil suurendab ettekasvatamise temperatuuri
langetamine bakterite kompetentsust, näiteks E. coli puhul on
transformatsiooniefektiivsus kõrgem, kui rakke kasvatati ette 18 30 C juures.
Sellele järgneb rakkude hoidmine jääl transformatsioonipuhvris.
Tõenäoliselt on jääl hoidmine vajalik rakumembraani voolavuse vähendamiseks,
sest on leitud, et vähemvoolavate membraanidega bakteritel tekivad mikropoorid
paremini. Sel ajal lisatakse ka DNA ning DNA kinnitub passiivselt
rakumembraanile. Ettekasvatatud rakud võetakse üles 0 4 kraadises
transformatsioonipuhvris, mille koostis varieerub väga tugevasti. Keemilise
transformatsiooni puhul on oluline, et puhver sisaldaks kahevalentseid
annaabi.ee 
