Mikroobifusioloogia
42 kraadi ja 0,5 minutit.
Temperatuurisokile järgneb rakkude hoidmine 2-5 minutit jääl ning
kasvatamine rikkal söötmel kasvuks temperatuurioptimumi juures.
Grampositiivsete bakterite korral vähendatakse rakukesta
muralüütiliste ensüümidega või EDTA lisamisega transformatsioonipuhvirsse.
Tekitatakse nn sfäro- või protoplastid elusad rakud, mille peptiidoglükaankiht on
nõrgendatud nii, et tekivad sfäärilised rakud. G(+) bakterite puhul on oluline, et
transformatsioonipuhver oleks isotooniline. Streptococcus faecium'i korral
suurendab sfäroplasti teket 80 mM NaCl lisamine, Lactobacillus lactis'el saadakse
sfäroplastid -amülaasi lisamisel. Mõnikord lisatakse G(+) bakterite söötmesse
penitsilliini või glütsiini, mis samuti vähendavad peptiidoglükaanikihi tugevust.
Bakterite söötmetesse ettevalmistamise ajal on lisatud veel isonikotiinhappe
hüdroasiidi (isoniatsiin, nt Streptomyces sp., Bacillus sp. Streptococcus sp.,
Clostridium sp