"transfekteeriti" - 1 õppematerjal

MOLEKULAARBIOLOOGIA ja RAKUBIOLOOGIA

painutab (bending) DNA molekuli. See DNA enhancer' ala paindumine lubab seondunud TFidel omavahel optimaalselt interakteeruda. Algselt nõrgad, mittekovalentsed valk-valk interaktsioonid saavad kõrvalelementidele seondunud faktorite poolt oluliselt tugevdatud, mis teeb ka TFide lokaalse kontsentratsiooni hästi kõrgeks. Valmistati plasmiidid, mis koosnesid -globiini geenist koos ja ilma 366-aluspaarise lõiguga SV40 DNAst. Need plasmiidid transfekteeriti rakkude kultuuri ja iga tekkinud RNA hübridiseeriti -globiini DNA prooviks (1, 2). Rakkude poolt sünteesitud -globiini mRNA kogus transfekteeriti ühte plasmiidi või teist töödeldi S1 nukleaasi kaitse meetodiga (3). Restriktsiooni lõigu proov, mis oli saadud -globiini cDNA kloonist, oli komplementaarne 5' otsale -globiini mRNA-s. 5'ots proovis märgistati 32P (punane täpp). -globiini mRNA kaitstud proovi hübridiseeriti ~340-nukleotiidine