Molekulaar- ja rakubioloogia
11. Pipeteeri rakususpensioon klaasidel olevatele transfektsioonisegudele, loksuta.
12. Aseta rakud inkubaatorisse: 37°C, 5% CO2
13. 2-4h möödudes pesta rakke 1xPBS-ga ja lisada rakkudele värske sööde (nüüd võib
sisaldada ka antibiootikume).
Tavaliselt rakkude transfekteerimisel nad külvatakse, lastakse paraja tiheduseni (30-70%)
kasvada ja transfektsioonisegud lisatakse kinnitunud rakkudele. Meie kasutame vastupidist
tehnikat aja kokkuhoiu huvides.
c. Rakud elasid tranfektsiooni üle edukalt mikroskoobi all oli näha, et rakkude
tihedus oli kasvanud uuesti 100%-ni.
d. Transfektsiooni efektiivsus oli umbes 30%.
13. a. Rakkude fikseerimise ja antikehadega märgistamise protokoll:
Vajalike lahuste valmistamine:
1. Fikseerimislahus: 4% PFA 1x PBSis, 10ml.
a. 0,4g PFA puru kaaluda väiksesse keeduklaasi
b. lisada 1ml 10x PBSi ja 9ml vett
c. soojendada magnetsegajal tõmbe all kuni puru on lahustunud.
2. 1xPBS, 50ml.
a. 5ml 10x PBS-i.
b
annaabi.ee 
