Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine
· Märgatav osa valgust on hüdrolüüsumata
· Tekkinud on vähesel määral vabu amh-d ja madalmolekulaarseid peptiide
Proteaasi aktiivsuse
määramise põhineb:
1. kaseiini hüdrolüüsil uuritava proteaasi toimel
2. TKÄ-ga mittesadenevate hüdrolüüsiproduktide sisalduse määrmine
spektrofotomeetrilisel meetodil
Miks?
· Tervikvalkude ja kõrgmolekulaarsed peptiidid, mille Mr > 10 000, sadestuvad lahusest
TKÄ toimel
· TKÄ inaktiveerib ensüümi ja peatab edasise hüdrolüüsi
· Sademe eraldamise järel jäävad lahusesse vabad amh-d ja madalmolekulaarsed
peptiidid, mille kontsentratsiooni saab kaudselt iseloomustada aromaatset tuuma
sisaldavate amh-te sisalduse alusel
Aromaatset tuuma sisaldavad
aminohapped:
1. Tyr (türosiin)
2. Trp (trüptofaan)
3. Phe (fenüülalaniin)