Molekulaarbioloogia praktikumi protokoll
elektroonselt), milles toob ära põhilised tulemused ja lisaülesannete vastused. Kirjelduses märgib,
millised etapid läbis edukalt ja millised olid probleemsed kohad.
Töö nr 1: Inimese genoomse DNA restriktsioon Cfr42I restriktaasi abil. Saadud fragmentide
ligeerimine "Bluescript" pBS SK+ plasmiidi ehk vektorisse.
Lähteained:
Inimese genoomne DNA (<300 kb fragmentidena), mis on eraldatud adenokartsinoomi (HeLa) või
teratokartsinoomi (NT2) kasvajarakkude lüüsil mitteioonse detergendi (NP40) abil. DNA on lahustatud
TE* lahuses (TE*, 10 mM Tris-HCl, pH 7,5; 1 mM EDTA-Na 2) kontsentratsiooniga 5-10
nanogrammi/mikroliiter (ng/l). HeLa ja NT2 rakuliini kohta vaata - http://www.lgcstandards-atcc.org/
Bluescript pBS SK+ plasmiid 10 ng/l lineariseeritud Cfr42I abil (~3h restriktsioon, puhastatud
fenooltöötluse, etanooliga sadestamise abil; lahustatud TE-s). Plasmiidi kohta vt Stratagene;
http://www.stratagene.com/
annaabi.ee 
