Mikroobifusioloogia
Selliste
kompetentide trasformatsiooni nimetatakse keemiliseks transformatsiooniks,
mis kirjeldati 1970. aastal. Transformatsiooniefektiivsus 10 5 109 CFU/1 g DNA
kohta. Kuigi keemiline transformatsioon on ammu teada ja väga levinud, siis
täpset mehhanismi, kuidas DNA rakkudesse transporditakse, pole teada.
Arvatakse, et DNA transport on kaheetapiline. Esimeses etapis toimub DNA
passiivne kinnitumine raku välismembraani liposahhariididele Ca-ioonide
vahendusel. Järgnev temperatuurisokk tagab aktiivse transpordi rakku.
Baktereid kasvatatakse ette tavaliselt rikkal söötmel teatud kasvufaasi. E.
coli rakke kasvatatakse kuni kesk-logaritmilise faasini (OD 0,4), mil on rakud
kõige kergemini muudetavad kompetentseteks. Samuti on oluline rakkude
tihedus kompetentide lahuses. Üldiselt, mida rohkem rakke on lahuses, seda
kõrgem on transformatsiooniefektiivsus. E. coli puhul peetakse optimaalseks 107-
108 rakku 1 ml kohta
annaabi.ee 
