"temedit" - 1 õppematerjal

Elektroforeesi aparaadi kokku panemine

4x kontsentreeriva geeli puhver (0,5M Tris-Cl, pH 1,25 ml 6,8) 10% SDS 50 µl mQ 3 ml APS 40 µl TEMED 4 µl Segasime omavahel antud järjekorras kokku:  vesi, 4x kontsentreeriva geeli puhver  SDS-i 10% lahus  akrüülamiid/bisakrüülamiidi lahus  Viimastena lisasime TEMEDit tõmbe all ja APSi, mis katalüüsivad polümerisatsioonireaktsiooni. 4. Valasime kontsentreerivat geeli lahutava (alumise) geeli peale ning panime paika kammi (ettevaatlikult). Jätsime geeli polümeriseeruma. 5. Sellel ajal valmistasime proovid ette. Segasime omavahel valgulahust ja 2x laadimispuhvrit (15 µl : 15 µl). Inkubeerisime denatureerimiseks 95oC juures 5 minutit. Jahutasime jäävannis. 6. Proovide jahutamise ajal asetasime geel foreesiaparaati