Molekulaarbioloogia aruanne
59.
60.
61.Kontroll-restriktsioon
62. Eesmärgiks on kontrollida kas soovitud DNA järjestus on sisestunud vektorisse nii nagu
plaanitud oli. Restriktsiooni analüüsi käigus lõigatakse saadud DNA-d restriktaasiga ja
vaadatakse elektroforeesil tekkinud DNA fragmentide suuruste järgi, kas soovitud DNA
järjestus on plasmiidi sisestunud. Valitakse selliseid restriktaase, mis lõikavad nii inserdi kui
vektori enda seest ning seejuures veel niimodi, et tekuksud erineva pikkusega jupid, mille
suurust oleks hea võimalikult täpselt kasutatava DNA Ladderiga võrreldes kontrollida.
1. Kontroll-restriktsiooni teostamiseks esmalt pipeteerisin kokku 5,5 μl vett, 3 μl puhastatud
DNA-d, 1 μl restriktaasi 10x puhvrit, 0,5 μl EcoRI restriktaasi, fuugisin ja inkubeerisin 37
°C 30 min jooksul
2. Kui 30 min on täis, fuugisin uuesti, kuna sooendamisel kaanele kondenseerus veeaur. Lisasin
2 μl 6x DNA värvi
3
annaabi.ee 
