"taustajoon" - 1 õppematerjal

Ensümoloogia

· Tasakaaluline geelfiltratsioon ­ põhineb geelfiltratsiooni kolonnil, mis suudab eristada valku ja ligandi. On kolonn, mis on tasakaalus puhvri ja ligandiga mingis [L] kindlas kontsentratsioonis. Paneme peale valgulahuse, milles ka tasakaaluline lahus sees vms. Tulemuseks on see, et (y-teljel ligandi signaal, x-teljel vol ­ platoo, jõnks üles, platoo, jõnks alla, platoo). Valk veab osa ligandist endaga kolonnist kaasa. Platoo on ligandi taustajoon. Valk veab ligandi välja, kust tuleb valk välja, sealt tuleb ka ligand välja. Lohk on seal, kust peaks tulema välja ligand, aga ligand tuli Fv# juba valguga koos välja. Ntx kolonn on tasakaalustatud tsellobioosiga. Mõõdetakse tsellobioosi hulka ja valgu hulka. Mida pikemad on elueerimisajad, seda laiemaks lähevad jõnksud vist. Kui K d on suur, siis peab valku olema ka samas suurusjärgus ­ siis aga ei saa seda meetodit kasutada