Biokeemia praktikumi protokoll
invertaasi ,
· tagab taandavate suhkrute määramiseks leeliselist kekkonda ja
vask()-triloon B kompleksi.
Kindlal ajahetkel reaktsioonisegust võetud proov viiakse
komplekslahusesse. Keemistemperatuuril taandub taandavate
suhkrute toimel -ks, mis eraldub punase sademena. Lahusesse jääb
ekvimolaarses koguses vaba triloon-B. Järgneb triloon-B
kontsentratsiooni määramine tiitrimisel kasutades 0,02 M lahust.
Toimub vase taaskomplekseerumine triloon-B-ga ja seda saab
visualiseerida, kui lisada lahusesse indikaator mureksiid (lahuse
värvus muutub violetsest roheliseks). Tiitrimiseks kulunud mahu järgi
leitakse varem koostatud kaliibrimisgrrafikust taandavate suhkrute
kontsentratsiooni.
Töö käik
1. Valmistan ensüümipreparaadi lahust. Tahke preparaadi mass g=10
mg, lahustiks atsetaatpuhver (5ml), töölahuse kontsentratsioon 2
mg/ml.
2. 50 ml katseklaasi pipeteerin 25 ml 7%-list sahharoosi lahust
annaabi.ee 
