"t181v" - 1 õppematerjal

Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine

Kaliibrimisgraafikult leidsin vastavalt proovide optilise tiheduse väärtustele D280 neis sisalduva türosiini kontsentratsioon (mg/ml või mol/ml). Saadud katseandmete alusel koostatan graafik, mis väljendab türosiini kontsentratsiooni ja reaktsiooni kestvuse vahelist sõltuvust CTyr = f(t) ja arvutan ensüümipreparaadi proteolüütiline aktiivsus, mis A vastab valemile: 3 C Tyr10 V 1V 22 A= t181V 3g CTyr ­ türosiini kontsentratsiooni muutus valitud ajavahemikus (mg/ml), t ­ hüdrolüüsi kestus st valitud ajavahemik (s), V1 ­ reaktsioonisegu (substraat + ensüüm) üldmaht (ml), V2 ­ valmistatud ensüümilahuse üldmaht (ml), 2 ­ TKÄ lahusest tingitud proovi lahjendus (1 ml 2 ml, seega L = 2), V3 ­ ensüümi maht hüdrolüüsisegus (ml), g ­ proteaasi preparaadi kaalutis (g), 181 ­ türosiini molekulmass. Tulemus