Molekulaar- ja rakubioloogia
lugemisraamiga. Minu kasutatud plasmiidile (L-Envo pEGFP-C2) sobib pEGFP-C2,
kuna Kui sisestataval järjestusel pole stopp-koodonit, peab olema stopp-koodon
kindlasti vektoris.
b) Skemaatiline esitus:
Vektor + insert:
9. a. Loomarakke säilitatakse pikemaajaliselt vedelas lämmastikus külmutatuna,
lühiajaliselt sobib ka -80oC. Külmutades tuleb rakkudele kindlasti lisada dimetüül sulfoksiidi
ja seerumit, mis kaitsevad rakke. Rakud tuleb maha jahutada võimalikult aeglaselt.
b. Rakkude sulatamine toimus peos soojendades. Sulatamine peab olema võimalikult
kiire, et rakud ei jõuaks DMSO keskkonnas soojeneda. Pärast sulatamist tuli kiiresti lisada
sooja (+37 oC) söödet, et lahjendada DMSO lahust piisavalt, et see poleks rakkudele enam
toksiline. Kõige olulisem rakkude sulatamisel ongi kiirus ning eelsoojendatud söötmete
kasutamine, et rakud ei satuks stressi.
c
annaabi.ee 
