Molekulaar- ja rakubioloogia
Teatud ellujäämisfaktorite puudumisel translokeerub FoxO3a
tuuma, mis selgitab seda, miks osades rakkudes leidub GFP-d nii tsütoplasmas kui ka tuumas.
Sinise värvi järgi saab leida rakkude koguarvu, kuna värvunud on DNA. Pildilt on näha, et
tuumad on täpilised see on põhjustatud DNA ebaühtlasest paiknemisest rakus.
Punaselt on värvunud tsütoplasmavõrgustik, näha on värvumata ümarad tuumad.
Rakkudest lüsaadi valmistamine
BCA töölahuse valmistamine
Standardvalguga kalibreerimiskõvera jaoks valmistasime 1000 µl lahust, oma proovi jaoks
440 µl lahust (400 µl + 40 µl varu). Oma lahuse jaoks võtsin 431,4 µl reagenti A ja 8,6 µl
reagenti B. Segasin hoolega ja jagasin 100 µl kaupa 96-se plaadi aukudesse.
BSA lahjendusterea ettevalmistus
1. Võta 5 epsi, kirjuta peale kontsentratsioonid
2. Pipeteeri igasse 50 µl lüüsipuhvrit
3. Võta 50 µl BSA 2 mg/ml lahust ja lisa esimesse epsi, suspendeeri korralikult.
4