Segu komponentideks lahutamine pöördfaasikromatograafia abil ning detekteerimine UV-detektoriga
analüüdi
omadustega, ainete lahutumiseks peab � > 1:
'
k 2 ( t R 2−t 0 )
α= '
=
k 1 ( t R 1−t 0 )
Töö eesmärk:
Segu komponentideks lahutamine pöördfaasikromatograafia abil ning
detekteerimine UV-detektoriga. Segus on järgmised ained:
Süsteem:
Kolonn: C18, L=150 mm, d=4,6 mm, dosake=5 μm
Eluent: atsetonitriil/vesi
Dosaator: 5 μl
Voolu kiirus: 0,7 ml/min
Detekteerimine 254 nm (UV)
Töö käik:
Valmista 5 mM standardlahustest 1 ml proovi metanoolis nii, et analüütide
sisaldus oleks 0,1 mM.
20 μl kvertsetiini, 20 μl rutiini. 1000 μl-40 μl=960 μl metanooli.
Puhasta enne katsete alustamist süstal ja dosaator vähemalt 3 korda Milli-
Q veega, seejärel prooviga
Sisesta proov dosaatorisse nii, et sinna ei satuks mulle!
Arvutused:
1. Teoreetiliste taldrikute arv (N) 5. Selektiivsuskoefitsent (�)
2. Teoreetiliste taldrikute kõrgus (H) 6. Standardhälve (SD) ja suhteline