Molekulaar- ja rakubioloogia
2. Eelnevalt kaalusin tuubi (1,01g), panin selle tuubi sisse oma geelitükk, ning kaalusin
neid kokku. Sain, et lõiku kaal on 1,18g – 1,01g = 0,17g.
3. Lisasin 0,1g geeli kohta 0,3 ml, ehk 17*0,3 = 0,51ml = 510 µl ADPd (Agarose
Dissolving Buffer), mis lahustab geeli, ning panin inkubeerida 55 C 5 juures geeli täeliku
sulamiseni. Vahepeal nipsutasin tuubi, et kiirustada sulamist.
4. DNA – geeli – puhveri segu pipeteerisin Zymo-SpinTM
kolonni (mis oma korda koosneb kolonnist ja kogumistopsist.
Kolonn sisaldab ränifiltri, läbi mille me laseme oma segu
jooksma. DNA seostub räniiksiidi osakestega, sellega ta ei
saata kogumistopsi, vaid jääb kolonni filtri peale. Kolonni
saagis minu DNA lõigule on vahemikus 70-90%) ja
tsenrifugeerisime 30sek ja viskasin läbivoolatud puhver välja.
5. Lisasin 200µl pesupuhvrit ja jalle fuugisin 30 sek x2 korda,
et olla kindel, DNA on puhas.
6