Biokeemia proteolüütilineensüüm
polüpeptiidahelas on katkenud vaid üksikud peptiidsidemed. Selles etapis sisaldab
reaktsioonisegu peamiselt pika ahelaga peptiide, märgatav osa valgust on hüdrolüüsimata
ja on tekkinud ainult vähesel määral vanu aminohappeid ning madalmolekulaarseid
peptiide.
Proteaasi aktiivsuse määramise meetod põhineb kaseiini hüdrolüüsil uuritava proteaasi
toimel ja järgneval trikloroäädikhappega mittesadenevate hüdrolüüsiprodukitde sisalduse
määramisel spektrifotomeetrilisel meetodil. Tervikvalgud ja kõrgmolekulaarsed peptiidid
sadestuvad lahuses TKÄ toimel, mis samas ka inaktiveerib ensüümi ja peatab edasise
hüdrolüüsi. Sademe eraldamise järel jäävad lahusesse vabad aminohapped ja
madalmolekulaarsed peptiidid, mille kontsentratsiooni iseloomustatakse kaudselt
aromaatset tuuma sisaldavate aminohapete sisalduse alusel.
Aromaatset tuuma sisaldavad aminohapped türosiin, trüptofaan ja fenüülalaniin