Molekulaar- ja rakubioloogia
seega saad vähem plasmiidi. Glükoos muudab E1 lahuse isotooniliseks, EDTA
seob kahevalentsed katioone (seega inhibeerib paljusid ensüüme, kes
töötamiseks neid enda koostisse vajavad) ja Tris on puhverdav reagent. RNAas
A eemaldab bakteraalse RNA prepsist(ehk prepareeritavast plasmiidsest
DNAst)
5. Lisa 0,2ml E2 lahust ning pipeteeri mitu korda edasi-tagasi.
E2-s sisalduv SDS solubiliseerib (lahustab pisikesteks puhvris ujuvateks
mullikesteks e.mitsellideks) bakteriraku membraani fosfolipiidid ning
denatureerib valgud. Naatriumhüdroksiid aga denatureerib DNA struktuurid.
Lahus muutub"tatiseks"
6. Inkubeeri laua peal 3 minutit. Selle aja jooksul muutub lahus selgemaks.
Juhul, kui inkubeerida üle 5 minuti, saad saagise hulka bakteri genoomseid
järjestusi ning vähenab plasmiidse DNA hulk, mis korrektselt järgmises etapis