Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum
pingetel. Selle tulemusena võib geel sulada ja DNA denatureeruda.
Elektroforeesipuhvrid tehakse tavaliselt kontsentreerituna ning neid hoitakse
toatemperatuuril. TAE (tris-atsetaat) puhver on neist kõige väiksema puhverdusvõimega ning
„väsib“ pikaajalisel foreesil. Sel juhul muutuvad geeli anoodsed komponendid („-„ laenguga)
happelisteks ja broomfenüülsinine, mis liigub anoodi suunas, muutub sinakaslillast kollaseks.
See muutus algab pH 4.6 juures ja 1õpeb pH 3.0 juures
TBE (tris-boraat) on veidi kallim, kuid suurema puhverdusvõimega. Kaheahelalise
lineaarse DNA fragmendid liiguvad umbes 10% kiiremini TAE-s kui TBE-s. Pikkade DNA
fragmentide jaoks on TAE lahutusvõime veidi parem kui TBE-l ja lühemaid fragmente lahutab
TAE halvemini kui TBE.
72
GEL-LOADING DYE. Segatakse uuritava prooviga enne geelile kandmist, et
1