Immunoloogia praktikumi protokoll
H L+ L+ 1:100
· Igasse süvendisse kanname 100µl proovi.
· Taimelehest eraldame mahla spetsiaalse mahlapressi abil, tsentrifuugime ja
eppendorftuubis lahjendame selle vajaliku kontsentratsioonini PBS-ga. L- terve leht, L+
nakatunud.
· Kanname kõik proovid vastavatesse süvenditesse ja jätame seisma üleöö 4 kraadi juurde.
· Plaadilt eemaldame mitteseostunud antigeeni ja peseme plaate 4x PBS/ Tw-ga ja 1x PBS-
ga shakeril.
· Plaadi blokeerime 1% BSA lahusega PBS/ Tw-s 1h toatemperatuuril, eemaldame
blokeeriva lahuse ja peseme 3x PBS/Tw-ga.
· Plaadile kanname ensüümiga konjugeeritud antikeha, lahjendus 1:500. Inkubeerime 1.5
tundi 37 kraadi juures. Konjugaadi eemaldame ja peseme 4x PBS/Tw-ga ja 1x PBS-ga.
· Valmistame peroksüdaasi substraadi lahuse ja ensüümreaktsiooni katalüsaatori kanname
süvenditesse . Värvusreaktsiooni mõõdetakse lainepikkusel 450.
Töö tulemus:
annaabi.ee 
