Geenitehnoloogia I konspekt
Afiinsuskromatograafia
puhul on kolonn täidetud geeliga, millel on väga spetsiifilised omadused. /Dna polümeraas seondub igal juhul DNA'ga. Oletame, et teeme
kromatograafilise eksperimendi, aga selle kolonni täiematerjali kulge seondame üheahelalise DNA molekuli. Pannes kolonni peale segu
erinevatest ainetest, mis rakust saime, siis kõik molekulid jooksevad kolonnist läbi, kuid DNA polümeraas jääb kolonni kinni, kuna ta
seonudus DNA'ga. Nüüd võime hiljem pipeteerida kolonni puhvrit, millel on näiteks väga aluseline või väga happeline pH, siis loome
mittelooduslikud tingimused, kus polümeraas pole võimeline DNA'ga seonduma. Nüüd jookseb kolonnist läbi (puhas) DNA polümeraas/.
Sellist geeliga kolonnkromatograafiat nimetatakse Liquid Chromatography'ks. Avaldades kolonnile survet (rõhku), siis nim seda HPC'ks
(High Pressure liquid Chromatograpy'ks)