Geenitehnoloogia (GMO)
eraldatakse rekombinantne DNA
Esimesena näitasid pärilikkuse funktsionaalse
ühiku ühest organismist teise ülekandmise
võimalikkust Stanley Cohen, Herbert Boyer
ja nende kaastöölised (Stanfordi ja California
Ülikoolidest) 1972 -1973. aastal.
DNA kloonimine võimaldab:
1. huvipakkuvate DNA fragmentide
piiramatus koguses paljundamist
2. geeniproduktide, enamasti valkude
tootmist
3. uurida geeni struktuuri, funktsiooni
DNA fragmentide saamine ja
ühendamine
DNA restrikteerimisel tekivad kas 5' või 3'
üleulatuvate üheahelaliste sabade, või nn.
tömpide otstega DNA fragmendid. Oluline on
konverteerida DNA otsad ühendatavateks.
Omavahel ühendatavad on kaheahelalise DNA
tömbid ja 5' või 3' üheahelalised komplementaarsed
DNA otsad. Mittekomplementaarsed
üheahelalised osad tömbistatakse ehk
täidetakse (Vt. DNA märkimise loengust -
Klenowi fragmendi ja T4 polümeraasiga).
Kõigi kolme erinevat tüüpi otstega DNA
molekulide ühendamiseks kasutatakse
ligeerimist s