Viroloogia praktikum
metallioone, mis on vajalikud nt DNaasi tööks + EDTA aitab stabiliseerida DNA
fosfaat selgrooga . Suspendeeritakse puhvris, sest vees võib DNA laguneda.
Lahus 2 sisaldab SDS ja NaOH. Aluseline töötlus, mille käigus detergent SDS
lõhub rakumembraani ja alus saab seonduda plasmiidse DNAga, mis seejärel
denatureerub. Aluselises keskkonnas rakud lüüsuvad ja DNA denatureerub.
Segada õrnalt.
Lahus 3 sisaldab KOAc (kaaliumoksaalatsetaat). See neutraliseerib lahust ja lubab
plasmiidse DNA renatureerimise ja KOAc aitab sadestada detergendi (SDS). Kuna
viiruse genoom on väiksem, siis renatureerub ta kiiremini kui bakteri 4Mb
suurune kromosoom. Kromosoom ei jõua kaheahelaliseks minna.
10. Miks RNA töötlus?
RNaasi töötlus aitab veelgi puhtamaks saada puhastatavat DNA lahust. RNaas
lagundab RNA rakkudes.
11. Millist tüüpi restriktaase kasutame?
tüüp 2 - lõike- ja seondumissait kattuvad. Lõikavad vaid dsDNA-d (ainult ds
annaabi.ee 
