Ensüümikineetika
ensüümkineetika parameetrite määramine
jne
· Mõõdame, kas produkti moodustumist või substraadi äratarbimist ajas
pidev jälgimine
astmeline jälgimine
· Mõõdame reaktsiooni algkiirust erinevatel substraadi kontsentratsioonidel
· Substraadi kontsentratsiooni vahemik 0,2KM 5 (10)KM (vajalik hinnang KM jaoks)
· Vajalik PH ja temperatuuri kontroll (ensüümid on õrnad molekulid)
· Muudame korraga ainult ühte reaktsioonitingimust
· Korduskatsed mõõtmisvea määramine
Ensüümkineetika andmete analüüs
Kas meie ensüümi kineetika vastab Michaelis-Menteni võrrandile?
Milline on kcat ja KM väärtus?
V = Vmax[S]/(KM + [S]) V versus [S] hüperbool
Michaelis Menteni võrrandi lineaarsed versioonid sirge võrrandid:
Sirge võrrand y = ax + b (a tõus ja b vabaliige)
1. Lineweaver-Burki kaksikpöördväärtuste teljestik: 1/V versus 1/[S]
1/V = (1/[S])(KM/Vmax) + 1/Vmax
2
annaabi.ee 
