Molekulaar- ja rakubioloogia
rakku plaadile siduvaid valke.
b. Rakkude tihedus plaadil oli umbes 50%, kuna plaadi suurus jäi samaks, tuli 10%
tiheduse saavutamiseks plaadile alles jätta 1/5 rakususpensioonist. Kokku oli 1200 l
suspensiooni, seega plaadile jäi 240 l ning eemaldasin 960 l.
11. a. Lüüsipuhvri valmistamiseks pipeteerisin 15 ml tuubi Tris-HCl (hoiab puhvri pH
sobivana), NaCl, Triton-X 100 (detergent, mis lõhub membraanstruktuurid, see vabastab
valgud rakusisemusest ja organellidest), glütserooli, EDTA (inhibeerib nukleaase, mis muidu
lagundaksid valgud) ning vett. Segasin ning hoidsin puhvrit jääl.
b. Sellist valgulüsaati kasutatakse tavaliselt edasi immuunosadestamiseks, Western
blotiks või ELISA analüüsiks. Need meetodid võimaldavad uurida rakkude valgulist koostist
või eraldada spetsiifilist valku ülejäänud raku komponentidest.
12. a. Kasutasime keemilist meetodit. Selleks lahjendasime DMEM-is eraldi DNA ja PEI