Biokeemia praktikumi juhend
vältel 30°C juures.
Kuna hüdrolüüsunud peptiidsidemete hulk ei ole otseselt mõõdetav, siis ongi üldlevinud, et
proteaaside aktiivsus avaldatakse valgu hüdrolüüsil vabanevate produktide, st
aminohapete ja peptiidide hulga kaudu.
Kuna uuritavad proteaasi preparaadid võivad erineda substraadispetsiifilisuse ja
optimaalse pH väärtuse poolest, siis enne tööle asumist informeerib praktikumi juhendaja,
millist subst-raati kasutatakse ja millise pH juures toimub uuritava proteaasi aktiivsuse
määramine. Neutraalsete ja aluseliste proteaaside aktiivsuse määramisel kasutatakse
substraadina reeglina kaseiini. Kaseiin on piima põhivalk, mis koostiselt on fosfoproteiin.
Tänu kaseiini molekulide kõrgele hüdrofoobsusele esineb ta piimas mitsellidena. Piimast
eraldatud kaseiin vees praktiliselt ei lahustu, küll aga lahustub vees hästi kaseiini Na-sool
(Na-kaseinaat)