Invertaasi aktiivsuse määramine
Cu2O
Triloon B koguse saab ära määrata tiitrimise teel kasutades 0,02 molaarset vasksulfaadi
lahust. Tiitrimise käigus tekitab vaba Triloon B uuesti sidemeid Cu(II) ioonidega mis on
3
3.1 Invertaasi aktiivsuse määramine Martin Tamm (121006YASB)
Biokeemia protokoll
nähtav ka värvuse muutumises kui on lisatud mureksiidi lahust. Mureksiid ehk
ammoonium purpuraat on indikaator tumesinise värvusega mida lisatakse
komplekslahusesse, et värvuse muutust märgata. Tiitrimise reaktsioon kulgeb järgmiselt:
Vaba triloon B + 2CuSO4 Cu(II)-triloon B kompleks + 2Na2SO4
Tiitrimiseks kulunud vasksulfaadi lahuse hulga järgi leitakse suhkrute kontsentratsioon
reaktsioonisegus kasutades kalibreerimissirget mis on eelnevalt valmist tehtud. Ensüümi
aktiivsuse ühik on mikrokatal (µkat). Üks mikrokatal võrdub 1 sekundi jooksul tehtud 1