"praimeripaariga" - 1 õppematerjal

Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum

suurenemine. 66  PCR meetodi variandid Multipleks PCR korral osaleb rohkem kui üks praimerite paar. Ühte reaktsiooni võib panna praimerid, mis on spetsiifilised erinevatele mikroorganismidele. Nested PCR on sisuliselt kaks järjestikust PCR reaktsiooni, kus teine PCR tehakse uue praimeripaariga esimese PCR produkti peal. Esimese reaktsiooniga saadakse amplikon sihtmärk- DNA-st. Seda amplikoni kasutatakse sihtmärgina teises reaktsioonis, kusjuures kasutatakse praimereid, mis asetsevad esimesest praimeri paarist seespool. Teise reaktsiooni käigus saadakse lühemaid nukleotiidahelaid. Nested PCR eeliseks on väga suur sensitiivsus ja spetsiifilisus. Samas on reaktsioon väga tundlik saastumisele varasema PCR produktiga, mistõttu tekivad kergesti vale-positiivsed tulemused.