"plastikpinna" - 1 õppematerjal

Molekulaarne ja rakenduslik immunoloogia

Seostunud jäävad, mitte-seondunud pestakse maha. Edasi vaadeldakse tulemust mikroskoobis.) ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay): ensüümseotud immuunsorbent-meetod. Kliinilises praktikas baseerub ELISAl paljude antikehade ja haigustekitajate antigeenide määramine. ELISA koosneb mitmest etapist:  ELISA plaadi (96-auguga mikrotiiterplaat) augud kaetakse antigeenilahusega, toimub antigeeni valgu seondumine plastikpinna külge. Edasi välditakse mittespetsiifiline seostumine, nt valgu kaseiini abil.  Kantakse peale analüüsitav seerumlahjendus (primaarne antikeha) ja inkubeeritakse.  Inkubatsioon ensüümiga (AP- alkaalne fosfataas või HRP- peroksüdaas), mis on konjugeerunud sekundaarse antikehaga.  Märgise hulga mõõtmine- ensüümaktiivsus määratakse kromogeense substraadi abil. Substraadilahus muutub ensüümaktiivsuse toimel värviliseks, spetsiaalse kolorimeetri (ELISA plaadi