Biokeemia praktikumi juhend
Spektrofotomeetria on ülimalt tundlik meetod väikeste ainekoguste tuvastamiseks,
identifitseerimiseks ja kvantitatiivseks määramiseks. Neeldumisspektri kuju iseloomustab
aine molekuli ehitust ja on seega ainele tunnuslik. Absorptsiooni (A) väärtus teatud
lainepikkusel võimaldab määrata aine kontsentratsiooni lahuses.
43
Lihtsustatult võib öelda, et kiirguse neeldumine (absorptsioon) spektri pikalainelises osas
suureneb konjugeeritud kaksiksidemete, aromaatsete tuumade ja vabu elektronpaare
omavate aatomite sisalduse puhul molekulis. Elektrolüütiliselt dissotseeruvate ainete
spektrid sõltuvad oluliselt ka lahuse pH väärtusest.
Selleks, et teada saada aine kontsentratsiooni uuritavas lahuses (ctundm) võib toimida
mitmeti.
· Mõõdetakse lahuses sisalduva tundmatu kontsentratsiooniga aine absorptsiooni
väärtus A lainepikkusel