Molekulaar- ja rakubioloogia
a. 50ml 1xPBS-ile lisada 50 µl 50% Tween-20 lahust, segada.
4. Permeabiliseerimislahus: 50mM NH4Cl, 0,5% Triton X-100 PBSis, 5ml
a. 0,25 ml 1M NH4Cl varulahust
b. 0,25 ml 10% Triton X-100
c. 0,5 ml 10x PBS-i
d. Lisada vett 5 ml-ni, segada (mitte vahtu ajada).
5. Blokklahus: 2% BSA, 0,1% NaN3 PBSis, 2ml
a. 0,04 g BSA-d
b. 0,02 ml 10% NaN3
c. Lisada 1xPBS-i 2ml-ni.
I Fikseerimine
1. Rakkudelt eemaldada vaakumiga sööde
2. Rakud fikseerida 0,5 ml 4% PFAga PBSis, inkubeerida 15 minutit toatemperatuuril.
3. Pesta rakke 3 korda 5 minutit á 1 ml 1x PBSiga.
II Neutraliseerimine ja permeabiliseerimine
1. Lisada rakkudele á 0,5 ml 50mM NH4Cl + 0,5% Triton X-100 PBSis, inkubeerida 15
minutit toatemperatuuril.
2. Pesta rakke 2 korda 5 minutit á 1 ml 1x PBSiga.
III Blokeerimine
Lisada rakkudele á 0,5 ml 2% BSA PBSis, millele on lisatud 0,1% NaN3, jätta seisma üleöö
(üle nädalavahetuse) +4°C juurde.
IV Inkubatsioon primaarse antikehaga
1
annaabi.ee 
