Molekulaar- ja rakubioloogia
vajalik, et rakkudel oleks piisavalt aega
paljuneda ja kolooniad moodustada. Külma panek on vajalik, et kogu plaat ei kasvaks
ühtlaselt rakke täis ning oleks võimalik kolooniaid eristada.
15. Päev enne järgmist praktikumi tuleb panna saadud valged kolooniad 1 ml Amp-i
sisaldavasse vedelsöötmesse kasvama. Selleks kasutada 1,5 ml eppendorfi, mille kordi
sisse torgata nõelaga õhuauk. Tuubid tõsta loksutavasse 37oC inkubaatorisse
otimaalselt 16 tunniks kasvama. Vajalik selleks, et välja valida valge koloonia rakud
(rakud, millesse on sisenenud inserti sisaldav plasmiid) ning neid paljundada.
d) Sulatasime mikrolaineahjus 200ml LB+Agar söödet kuni agari täieliku sulamiseni.
Täielikult üles sulatatud söötme jahutasime ~50°C juurde (kõrgemal temperatuuril
võib antibiootikum hävida) ning lisasime 200 l X-gal (lõppkonts. 20g/ml) vajalik