Rekombinantsed peptiidid ja kloonimine
Saab identsifitseerida. Genoomse kogumi
loomiseks, kasutatakse genoomse DNA lõikamist restriktaasiga ja selle ligeerimine vektorisse:
bakteriofaagid, kosmiidid, BAC ja YAC (Võivad esineda probleemid: geeni lõikamine keskel; geen
on suurem, kui vektor võib vastu võtta. Kasutatakse randoomset lõikamist; ~20kb)
Esineb mitu varianti cDNA sünteesimiseks:
1. cDNA sünteesitakse mRNA järgi, mille otsas on Polü-A-saba, mille praimeriks on polü-T
oligonukleatiidne järjestus. Süntees toimub 5 3 suunas. Protsessi viib läbi revertaas dNTP
olemasolul. Aluselises keskkonnas ühe ahelalise DNA ots keerab ja mängib rolli praimerina,
sünteesitakse teist ahelat. Seda pööret lõikab ära S1 nukleaas. Lõpuks on kaheahelaline
cDNA.
2. Kui esineb DNA:RNA kompleks, selle kompleksi tunneb ära ensüüm Rnase H, mis lõhustab
RNA juppideks. Need juppid mängivad rolli praimeritena, mille abil sünteesitakse teist DNA