Ainete segu lahutamine geelkromatograafia meetodil
Arvutasin geelimaatriksi mahu Vg = k · Vt ja sellest lähtuvalt kolonni iseloomustava
maksimaalse elueelirimismahu Vxmax = Vt - Vg
Vg = 0,1 · 124,4 cm3 = 12,44 cm3
Vxmax = 124,4 cm3 12,44 cm3 = 111, 96 cm3
Arvutasin fraktsioonide üldarvu n, arvestades ühe fraktsiooni mahuks 2ml; seega
n = Vxmax / 2 = 111,96 cm3 / 2 = 55, 98 56
Katseklaasistatiivi asetasin fraktsioonide arvule vastava hulga kindla mahu järgi
( 2ml ) kalibriitud katseklaase ja numereerisin need.
Kolonni lähedusse paigutasin voolutuslahutuse ehk eluendi pudeli ja märkisin üles
voolutuslahuse koostise:
50 mM Tris HCl
150mM NaCl
pH = 7,5
Varusin väikse keedkulaasi, kuhu kogusin kolonni täidise pinnal oleva eluendi, mis
enne uuritava segu sisestamist kolonnist välja lasin.
2.2. Segu komponentide lahutamine
Avasin ettevaatlikult kolonni väjavooluava ja täidise kohal olev voolutuslahus hakkas
aeglaselt kolonnist välja tilkuma