Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum
nii RNA kui DNA. Moodustuvad kaheahelalised hübriidid võivad olla kas DNA-DNA, RNA-RNA võis
siis DNA-RNA ahelad.
63
Joonis 1. Nukleiinhapete hübridisatsiooni põhimõte. Positiivse hübridisatsiooni korral moodustub sondi ja
sihtmärgi vahel kaksikahel. Negatiivse hübridisatsiooni korral homoloogia sondi ja sihtmärgi vahel puudub.
Hübridisatsioonireaktsiooni etapid
(1) üheahelalise nukleiinsondi valmistamine ja märgistamine;
(2) üheahelalise sihtmärk - DNA või RNA valmistamine;
(3) hübridisatsioonireaktsioon
(4) reaktsiooni tulemuste hindamine.
ÜHEAHELALISE NUKLEIINSONDI VALMISTAMINE JA MÄRGISTAMINE E. SONDI DISAIN sõltub
eesmärgist. Kui soovitakse leida uuritavas materjalis grampositiivseid baktereid, peab sond olema
komplementaarne ainult grampositiivsetel bakteritel leiduva DNA järjestusega. Võimalik on