Geenitehnoloogia kordamisküsimuste vastused
In situ koloonia- ja faagilaikude hübriidimine on teiseks käsitlusviisiks
rekombinantse DNA selektsioonil. Kolooniahübridiseerimise meetodit kasutatakse
peale plasmiidide ka kosmiididega konstrueeritud klonoteekide puhul. Faagilaikude
hübriidimist kasutatakse aga faag lambda põhjal konstrueeritud genoteekide puhul.
Mõlemad hübridiseerimismeetodid on väga sarnased. Koloonia hübridiseerimisel
tehakse transformantide kolooniatest jäljendid nitrotselluloos- või nailonfiltritele,
filtrile kandunud rakud lüüsitakse kohapeal, nukleiinhape immobiliseeritakse filtrile
ja filtril olevat DNAd hübridiseeritakse radioaktiivse märgisega DNA või RNA
sondiga, mis sisaldab meid huvitavate järjestuste homoloogseid järjestusi.
Mittehübriidunud radioaktiivne materjal pestakse filtritelt välja, filtreid
eksponeeritakse röntgenifilmile ja filmid ilmutatakse. Need kohad, kuhu filtril kinnitus
radioaktiivne märge, ilmuvad filtrile tumedate laikudena. Selliste laikude asukoht
annaabi.ee 
