Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine
· 1 µkat - ensüümi proteolüütilise aktiivsuse ühikuks, mis peegeldab 1 µmooli peptiidsideme
hüdrolüüsi 1 sekundi jooksul 30C juures. (kuid seda on raske mõelda siis proteaaside
aktiivsus avaldatakse vabanevate produktide hulga kaudu)
· Neutraale ja alulise proteaaside aktiivasusi määramise jaoks kasutatakse põhiliselt kaseiini.
Kaseiin valk(fosfoproteiin), mis leidub piimas. Kaseiini molekulid on hüdrofoobsed ja
esinevad piimas mitsellina. (Na-kaseinaat aga lahustub vees).
Proteaasi aktiivsuse objektiivseks hindamiseks jälgitakse kaseinni hüdrolüüsi algstaadiumit,
kui polüpeptiidahelas on katkenud ainult üksikud peptiidsidemed.
· Proteaasi aktiivsuse määramise meetod põhin kaseiini hüdrolüüsil proteaasi toimel ja
järgneval trikloorädikhappega mittesadeneva hüdrolüüsiproduktide sisalduse määramisel
spektrofotomeetrilise meetodi kasutades.