Molekulaarbioloogia aruanne
2. päev: lisasin PCR segule 4 μl 6x DNA värvi, et DNA nähtav oleks, ning kandsin kogu segu
TAE geelile (hambasse). DNA lahutamine toimub elektrivoolu toimel (100 V 15 min)
25.
26.
27.
28.
29.
30. Kuna minu produkt ei ole üldse geelipildil nähtav, võin järeldada, et midagi tegin valesti PCR
reaktsiooni teostamisel (nt. viga pipeteerimisel või mingi muu viga). Sain geelitükki teiste
plasmiidi ja praimeritega.
31. Plasmiid mEB1 pEGFP-N1, praimerid mEB1F ja mEB1R. Oodatav pikkus – 700
aluspaari.
32.
33.PCR produkti puhastamine geelist Zymoclean kitiga.
34. Eesmärgiks on puhastada välja PCRi segust meid huvitav produkt, et vältida praimerite,
nukleotiidide või erinevate soolade mõju järgmisele etapile.
35. Plasmiid mEB1 pEGFP-N1, praimerid mEB1F ja mEB1R. Oodatav pikkus – 700
aluspaari.
36. Puhastamine:
1. Saadud geelitükk kaalus 0,04 g. Lisasin 120 μl ADB-d (0,3 ml 0,1 g geeli kohta)
2