TTÜ Biokeemia praktikum: Glükoos
Töö käik
Eelnevalt valmistatakse tööreaktiiv (25 ml):
· 2,5 mg glükoosi oksüdaasi
· 1,5 mg peroksüdaasi
· 16,6 ml 0,2 M fosfaatpuhvrit, pH 6,0
· K4[Fe(CN)6] 0,1% lahust koguses, mis on vajalik kolvi täitmiseks kuni lõppmahuni
Uuritava lahuse ettevalmistamine
· Prooviks kasutatakse pressitud apelsinimahla
· Lahuseks võetakse 0,5 ml mahla, pipeteeritakse see 200ml mõõtekolbi ja täidetakse
jooneni destilleeritud veega (400x lahjendus).
· Mahlalahusest eemaldatakse filtrimise teel viljaliha.
Glükoosilahuste valmistamine kaliibrimisgraafiku koostamiseks. Koostatakse
kaliibrimisgraafik, mis seob glükoosi kontsentratsiooni lahuse absorptsiooniga ehk optilise
tihedusega 410 nm juures.
· Võetakse 1,0 mg/ml glükoosi lahus
· Valmistatakse sellest 3 eri kontsentratsiooniga lahust destilleeritud vees: 0,25; 0,125 ja
0,0062 mg/ml
Värvusreaktsiooni läbiviimine
· Reaktsioon viiakse läbi toatemperatuuril