BIO- JA GEENITEHNOLOOGIA, EKSAM
DNA-ahela sünteesi terminatsioonist kasutatakse sünteesiga järjestamist,
mispuhul detekteeritakse nukleotiidide lülitamisel toimuvat pürofosfaadi
vabanemist.
33. Kirjeldage Illumina sekveneerimise protseduuri. 4:23. 5:5-10.
Kiibil on nukleotiidid ja DNA polümeraas. Need nukleotiidid on fluorestsentsiga
märgistatud, kus teatud värv vastab alusele. Neil on ka terminaator, nii et lisatakse
ainult üks nukleotiid korraga. Kiipidest tehakse pilt. Igas lugemiskohas on
fluorestsentssignaal, mis näitab lisatud nukleotiidi. Seejärel valmistatakse kiip ette
järgmiseks tsükliks. Terminaatorid eemaldatakse, et saaks lisada järgmist nukleotiidi
ja fluorestseeruv signaal eemaldatakse, takistades sellega järgmise pildi saastamist.
Protsessi korratakse, lisades korraga üks nukleotiid ja igat nukleotiidi pildistatakse
eraldi. Seejärel kasutatakse arvutit nukleotiidide asukoha tuvastamiseks igas pildis,
et konstrueerida nukleotiidide jada