Rekombinantsed peptiidid ja kloonimine
Millised on poolt ja vastu argumendid mõlema meetodi puhul. Millised probleemid
võivad esineda?
Blunt-end
+ pole vaja komplimentaarset fragmenti ligeerimiseks, kuna blunt otsad võivad teiste mistahes
blunt otstega ligeerida. Vektor ise kokku ei kleepu.
-vähem efektiivne meetod ja aeglasem, kuna niisuguste otste kokku puude on juhuslik.
Sticky end
+ lihtsam ligeerida, otsad on komplimentaarsed ja kergesti leiavad teine teist ning ligeeruvad
kokku
-selle meetodi puhul, pärast restriktaasidega töötlemist, vektor võib kiiresti tagasi kokku ligeerida
(lahenduseks defosforüülimine, aga see võib takistada ligeerimist).
Mõlemate meetodi puhul võib esineda oht: DNA järjestuse tagasipöördumine.
16. Mis on cDNA? Kirjelda erinevaid meetodeid cDNA sünteesimiseks. Milliseid erinevaid
tüüpi praimereid saab kasutada cDNA sünteesis? Kirjelda, mis on cDNA ja genoomse
DNA kogum (,,library").