"lahustatune" - 1 õppematerjal

Molekulaar- ja rakubioloogia praktikum

 Pipeteerin kogu koguse ränikolonni.  Tsentrifuugin – DNA jääb räni külge ja ülejäänud puhvri viskan ära.  Pipeteerin peale 200 µl pesupuhvrit, tsentrifuugin ja kordan.  Tõstan kolonni puhtasse 1,5ml tuubi. Elueerin DNA kolonnist elueerimispuhvri abil. Inkubeerin paar minutit laua peal  Tsentrifuugin 1 minuti. Seejärel on tuubi põhjas elueerinud PCRi produkt lahustatune elueerimispuhvris.  Kontrollimiseks segan kokku 2 µl eluaati, 6,33 µl MQ ja 1,66 µl 6x värvi. Tsentrifuugin ja kannan geelile. Geeli pilt tulemuste all. Tulemus: Minu rada nr8. Miks on vaja PCR produkti puhastada? Tahame vabaneda kõigest üleliigsest lahuses, nätieks praimeritest, nukleotiididest ja erinevatest sooladest, et need ei mõjutaks meie järgmiseid etappe. Milleks on vaja teha kontrollgeel? 8