Molekulaarbioloogia aruanne
plaanitud oli. Restriktsiooni analüüsi käigus lõigatakse saadud DNA-d restriktaasiga ja
vaadatakse elektroforeesil tekkinud DNA fragmentide suuruste järgi, kas soovitud DNA
järjestus on plasmiidi sisestunud. Valitakse selliseid restriktaase, mis lõikavad nii inserdi kui
vektori enda seest ning seejuures veel niimodi, et tekuksud erineva pikkusega jupid, mille
suurust oleks hea võimalikult täpselt kasutatava DNA Ladderiga võrreldes kontrollida.
1. Kontroll-restriktsiooni teostamiseks esmalt pipeteerisin kokku 5,5 μl vett, 3 μl puhastatud
DNA-d, 1 μl restriktaasi 10x puhvrit, 0,5 μl EcoRI restriktaasi, fuugisin ja inkubeerisin 37
°C 30 min jooksul
2. Kui 30 min on täis, fuugisin uuesti, kuna sooendamisel kaanele kondenseerus veeaur. Lisasin
2 μl 6x DNA värvi
3. Elektroforeesiks valasime 100 ml TAE geeli (1%)
4. Pipeteerisin kogu oma segu agaroosgeeli hambasse.
5
annaabi.ee 
