"kuumaveebakteri" - 1 õppematerjal

BIO- JA GEENITEHNOLOOGIA, EKSAM

meetodis, mis võimaldab in vitro paljundada ehk amplifitseerida konkreetset, uuritavat DNA fragmenti. See meetod on loodud ülilihtsal põhimõttel: temperatuuride muutmisel. Selleks on PCR-masin, millesse asetatakse 0,2 ml-sed tuubid DNA-proovidega ja käivitatakse programm, mis automaatselt kuumutab-jahutab kindlal temperatuuril kindlate ajavahemike järel. (PCR) vajalikud komponendid (joonis 5.2.2.4.):  DNA proov, mida uuritakse;  DNA-plümeraas, täpsemalt on see kuumaveebakteri nimest tulenev Taq-polümeraas;  Nukleotiidid – A, G, C, T, mida läheb DNA molekuli sünteesiks vaja;  2 praimerit (tavaliselt 15–25 nukleotiidi pikkused DNA lõigud ), millest üks on komplementaarne uuritava DNA-lõigu ühe otsaga ja teine on komplementaarne teise otsaga;  puhverlahus, mis on keskkonnaks. PCR ETAPID 1) tuubis oleva dna denatureerimine. Temperatuur tõstetakse 90–95 °C